技術(shù)文章
Technical articlesTCA沉淀——過濾法1.為了檢測放射性標(biāo)記物結(jié)合蛋白質(zhì)的摻入量,每個樣本吸取一定量(通常為5//1)加入盛有100t~lBSA溶液(1mg/m1)的1.5m1錐形管中。2.每管加入lmll0%冰冷的三氯醋酸,混勻。3.冰上孵育30min。4.將玻璃纖維濾紙置于一適當(dāng)?shù)倪^濾器上,用少量的10%三氯醋酸真空過濾,預(yù)先濕潤濾紙。5.滴加樣本于濾紙的中央,而末摻入標(biāo)記物則通過濾紙除去,被TCA沉淀的蛋白質(zhì)則吸附在濾紙上。6.再用少量的10%三氯醋酸(數(shù)毫升)洗滌2次。7.用少量的95...
疾病診斷、細(xì)菌鑒定,關(guān)鍵在鑒定毒素。從材料中如能迅速檢出毒素為,檢出速度快,治療預(yù)防能及時。從癥狀、流行病學(xué)懷疑肉毒癥后,應(yīng)先千方百計地在極短時期內(nèi)證明檢材中是否有肉毒梭菌毒素,搶時間救人。在設(shè)法證明毒素存在的同時,進(jìn)行細(xì)菌分離、鑒定及產(chǎn)毒能力測定。(1)檢驗程序檢驗菌株是否產(chǎn)生肉毒毒素,或污染食品中是否有產(chǎn)毒素的肉毒梭菌存可按圖進(jìn)行檢驗。檢樣接種肝湯35℃培養(yǎng)3天檢樣接種TPCYT肉湯2℃培養(yǎng)5天↓↓取液體部分7000r/min離心30min↓取上清中過滅菌↓↓↓血清學(xué)試驗...
本實驗是以質(zhì)體pBluescriptIISK(-)為材?,以?同限制酶作用,經(jīng)電泳分離DNA片段后,比較各DNA片段的泳動?與分子?,藉此練習(xí)限制酶的使用、電泳分析及簡?DNA限制圖譜(restrictionmap)的建?。以DNA操作為主的各項實驗必須維持溶液與容器?受核酸分解酵素污染,因此請同學(xué)遵守以下原則并養(yǎng)成習(xí)慣:a.請隨時保持實驗桌的清潔。b.微?移液器頭及微?離心管取出后?即將蓋子蓋上。c.請勿用手觸摸滅過菌的微?移液器頭、微?離心管及各種容器的內(nèi)部。d.溶液打開...
器材和試劑]●PCR試劑和設(shè)備●1ug任何舍有scFv及(GIy4Ser)3接頭的載體●RHuJH引物、RHuVκ引物和RHuVλ引物,10pmol/ul[方法]1.在0.5ml微量離心管內(nèi)配制用于擴增的主混合液。所顯示的主混合液用于VH—Vκ接頭。對于VH—Vλ接頭的主混合液,n=29。單個反應(yīng)主混合液/ul(n=25)●水37925●10×Vent緩沖液5.0125●20×dNTPs2.562.5●VentDNA聚合酶0.512.52.取24支0.5ml試管,每管分別加入...
器材和試劑]●大腸桿菌TGl菌株(Stratagen)●37℃孵育箱(NewBrunswickScientmc)●SorvatlRC5離心機(或同類型),GS3轉(zhuǎn)頭(均在4℃預(yù)冷)●預(yù)冷的500m1聚丙烯離心管●2L有擋板錐形瓶●基本培養(yǎng)瓊脂板[105gK2HP04、4.5gKH2P04、1g(NH4)2S04、0.5gNa3C6H5O72H2O、15g瓊脂加水至幾。高壓滅菌,冷卻至錐形瓶微溫;接著加入lmllmol/LMgS04、0.5ml1%維生素B:(硫胺)和10m12...
2011年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎北京時間3日下午揭曉,來自加拿大、美國和盧森堡的三名科學(xué)家因在免疫系統(tǒng)方面的貢獻(xiàn)獲獎。據(jù)外電報道,來自瑞典卡羅琳醫(yī)學(xué)院的消息稱,2011年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎由三人分享。其中一半獎勵布魯斯·巴特勒(BruceA.Beutler)和朱爾斯·霍夫曼(JulesA.Hoffmann)在激活先天免疫方面的發(fā)現(xiàn)。另外一半獎勵拉爾夫·斯坦曼(RalphM.Steinman)“發(fā)現(xiàn)樹狀細(xì)胞和它在適應(yīng)性免疫中的作用”。此前曾獲得拉斯克獎的中國科學(xué)家屠呦呦無緣...
扎人傳播HIV,成功率低于千分之三艾滋病毒污染的血液離開人體后,多長時間病毒會死亡,目前醫(yī)學(xué)界尚未明確的答案。因為,這與血液存儲環(huán)境的溫度、濕度、紫外線條件以及容器等都有直接關(guān)系。不過,想通過扎人傳播艾滋病毒,是非常困難的。即使是艾滋病人的新鮮血液,在無意中扎入他人體內(nèi)——比如醫(yī)生給病人打針后誤扎了自己——在不采取任何防護(hù)措施的前提下,感染艾滋病毒的幾率也只有3‰,即1000人中有3人會被感染。如果在被扎后及時采取防護(hù)措施,被艾滋病病毒感染的風(fēng)險還會再減少80%。針管里的血會...
一個新的科研成果可能使抗結(jié)核病工作前進(jìn)一大步;前日,記者從華中農(nóng)大蛋白質(zhì)組學(xué)研究中心獲悉,該校農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點實驗室何正國教授的課題組發(fā)現(xiàn),基因WhiB—3可能是調(diào)控結(jié)核病原潛伏感染和耐藥性的關(guān),鍵基因之一。據(jù)介紹,結(jié)核病的罪魁禍?zhǔn)资墙Y(jié)核分枝桿菌,而在組成結(jié)核分枝桿菌的基因中,哪些基因是起關(guān)鍵作用,并控控制其他基因,導(dǎo)致結(jié)核病病原傳染和產(chǎn)生耐藥性的基因“黑老大”呢?如果能找出它,就能有針對性的進(jìn)行研究,并生產(chǎn)出柜關(guān)藥物。何正國教授說,基因WhiB—3可能就是起關(guān)鍵作用的功...